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幾種常見轉(zhuǎn)染試劑的特點(diǎn)和應(yīng)用

轉(zhuǎn)染試劑在細(xì)胞轉(zhuǎn)染、細(xì)胞識(shí)別、抗體蛋白研發(fā)等領(lǐng)域廣泛使用，通常可以直接購(gòu)買或者過實(shí)驗(yàn)室中DIY配制。Lipofectamine、fugene、磷酸鈣、是較為常見的轉(zhuǎn)染試劑，其實(shí)目前市場(chǎng)上的轉(zhuǎn)染試劑盒針對(duì)某些轉(zhuǎn)染進(jìn)行了優(yōu)化，使用起來較為方便。比如：細(xì)胞類型來自于Lonza系列的Amaxa人單核細(xì)胞核因子試劑盒、Invitrogen的Silencer(R)siRNATransfectionIIKit等試劑盒在細(xì)胞轉(zhuǎn)染方面都有著較好的效果。一、針對(duì)siRNA遞送優(yōu)化的常用轉(zhuǎn)染試劑市...

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GFP抗體應(yīng)用中的常見問題有哪些

GFP抗體應(yīng)用中的常見問題有哪些？標(biāo)簽：抗體蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)科學(xué)科普GFP抗體GFP適合于蛋白質(zhì)標(biāo)記，這是該抗體的天然優(yōu)勢(shì)。雖然它非常適合實(shí)時(shí)成像，例如，作為TP53MITE-seq屏幕的報(bào)告器，其他應(yīng)用導(dǎo)致GFP熒光猝滅，這使得有必要使用抗GFP抗體。組織樣本的冷凍保存、組織學(xué)制備和固定劑的使用通常會(huì)導(dǎo)致GFP熒光*或部分喪失，因此需要使用抗GFP抗體來獲得可靠的結(jié)果。通過蛋白質(zhì)印跡檢測(cè)GFP標(biāo)記的蛋白質(zhì)和通過免疫沉淀研究蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用也需要使用GFP抗體。抗GFP抗體可...

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看完本篇你或許會(huì)對(duì)振蕩培養(yǎng)箱有更多的了解

看完本篇你或許會(huì)對(duì)振蕩培養(yǎng)箱有更多的了解振蕩培養(yǎng)箱是一種廣泛應(yīng)用于微生物培養(yǎng)、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)、以及分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)具有加熱和制冷雙向調(diào)溫系統(tǒng)，溫度可控的培養(yǎng)箱和振蕩器相結(jié)合的生化儀器;振蕩培養(yǎng)箱主要集恒溫培養(yǎng)箱與振蕩器于一體，節(jié)約空間占地小，功能多投資少;振蕩培養(yǎng)箱外殼為ABS工程塑料制作、腔體全鏡面不銹鋼組件，不生銹;傾斜式人性化的控制面板，大屏幕背光液晶顯示屏，更具良好的視覺效果;該設(shè)備設(shè)有運(yùn)行參數(shù)記憶功能，避免繁瑣操作并密碼鎖定，杜絕人為誤操作;振蕩培養(yǎng)箱廠家的振蕩培養(yǎng)箱設(shè)...

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T細(xì)胞檢測(cè)方法有哪些？

由于T細(xì)胞具有多種亞型，所以研究膜結(jié)合T細(xì)胞受體的技術(shù)困難，但在某些情況下，您希望能夠做到這一點(diǎn)，例如分析哪些免疫記憶已被誘導(dǎo)以測(cè)量個(gè)體對(duì)特定抗原的反應(yīng)程度。此時(shí)，有多種方法可以實(shí)現(xiàn)，主要分為兩大類：一種是通過測(cè)量特征性反應(yīng)（例如細(xì)胞因子分泌）來檢測(cè)T細(xì)胞對(duì)刺激作出反應(yīng)的激活，另一種是通過細(xì)胞的特異性來分析T細(xì)胞受體。下面總結(jié)了一下T細(xì)胞分析的6種方法：1.限制稀釋培養(yǎng)該技術(shù)涉及通過使用不同稀釋度的細(xì)胞來測(cè)量對(duì)特定抗原產(chǎn)生反應(yīng)的T細(xì)胞的頻率，然后測(cè)量無反應(yīng)的孔數(shù)。不用過多計(jì)算...

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熒光素酶檢測(cè)時(shí)的注意事項(xiàng)

標(biāo)簽：熒光素細(xì)胞轉(zhuǎn)染熒光強(qiáng)度熒光檢測(cè)啟動(dòng)子螢火蟲可以在螢光素酶的存在下將螢光素轉(zhuǎn)化為氧化螢光素以發(fā)光。利用熒光素酶的較常見的科學(xué)測(cè)定是報(bào)告基因測(cè)定，其中可以通過測(cè)量來自熒光素酶反應(yīng)的光信號(hào)來跟蹤轉(zhuǎn)錄激活或抑制。建議使用雙熒光素酶系統(tǒng)，其中發(fā)生二次生物發(fā)光反應(yīng)。第二個(gè)信號(hào)由另一個(gè)分子發(fā)出。最常見的是由也可以生物發(fā)光的海腎基因編碼（一些質(zhì)粒已經(jīng)包含海腎和螢光素酶基因，例如Promega的pmirGLO）。這允許您將熒光素酶表達(dá)標(biāo)準(zhǔn)化為對(duì)照并測(cè)量您的相對(duì)轉(zhuǎn)染效率。熒光素酶檢測(cè)過程中...

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